异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-dextran)
异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-dextran)是一种在生物学和医学研究中广泛应用的荧光探针。以下是对其详细解析:
一、定义与结构
FITC-dextran是由异硫氰酸荧光素(FITC)通过稳定的硫代氨甲酰键连接到葡聚糖分子上形成的荧光标记物。葡聚糖是一种由葡萄糖分子通过α-1,6糖苷键连接而成的多糖,具有良好的水溶性、低毒性和生物相容性。
二、物理性质
外观:FITC-dextran通常为浅黄色至暗黄色至暗橘色(或绿色)粉末,具体颜色可能因生产批次和储存条件略有差异。溶解性:易溶于水或盐溶液,也溶于DMSO、甲酰胺等极性有机溶剂,不溶于更低的脂肪醇、丙酮、氯仿和二甲基甲酰胺(DMF)。三、荧光特性
荧光颜色:绿色。激发与发射波长:通常激发波长为492495nm,发射波长为515520nm。荧光强度影响因素:受缓冲液pH和离子强度的影响,通常在pH大于8的条件下观察到*大荧光强度。四、制备方法
准备葡聚糖:选择适当分子量和浓度的葡聚糖作为起始物质。激活FITC:在碱性条件下(如使用碳酸氢钠等碱性缓冲液)激活FITC。标记反应:将激活的FITC与葡聚糖在适当的缓冲液条件下反应,使其发生共价结合。反应条件包括适当的pH、温度和反应时间。纯化:使用透析或柱层析等方法去除未反应的FITC和其他杂质,得到纯化的FITC标记葡聚糖。表征:使用荧光光谱等方法对标记产物进行表征,确认FITC成功连接到葡聚糖上。
小编zcy,仅用于科研